无核珍珠培育的手术技术

　　1、制备小片

　　小片是珍珠形成的物质基础，小片的质量直接关系到珍珠是否能够形成及其品质的优劣。取片部位和小片形状、大小、厚度及小片的制作技术对育成珍珠的产量和质量产生重大影响。手术操作如下：

　　1.1剖蚌用开壳刀切断小片蚌前、后闭壳肌，蚌壳张开，洗净外套膜、内脏团等处的污物。切勿弄伤外套膜的边缘膜，让其完整地贴在蚌壳内。

　　1.2分膜将边缘膜的内、外表皮分开，取边缘膜的外表皮制备细胞小片。内、外表皮分开的手术方法有剥膜法、撕膜法、削膜法三种。

　　1.2.1剥膜法即在蚌壳上剥离边缘膜切取外表皮。用剪刀在边缘膜前或后闭壳肌附近剪开一个小口，一手用镊子夹住内表皮，一手用通道针插进内、外表皮间，两手配合，边前伸边分离，直至内、外表皮全部剥离。剥离过程中，通道针尽可能偏向于外表皮一侧，使外表皮少带结缔组织，得到厚薄较均匀的小片条。然后用切片刀切下外表皮，用镊子夹取置于玻片上，注意珍珠分泌面朝上放置。

　　1.2.2撕膜法即先切取边缘膜，外表皮朝上放在玻片上，用镊子压住内表皮一端，用平头镊子夹住同一端外表皮，顺着组织结构向后轻轻撕拉，使内外表皮分离。撕拉时用力要均衡，防止小片条撕断或撕裂。

　　1.2.3削膜法用锋利的解剖刀从边缘膜的前端或后端开始，徐徐削去外套膜内表皮和结缔组织，然后切取外表皮置于玻片上。

　　实践证明，剥膜法操作难度不大，容易掌握，但易损伤外表皮细胞，所制得小片厚薄不均，影响珍珠的产量和质量。撕膜法是目前生产中最常用方法，技术难度较大，小片厚薄较均匀，损伤较小，质量高，育成珍珠的光泽、形状及产量均属上乘。削膜法操作难度大，速度慢，一般只适用于褶纹冠蚌、背角无齿蚌制片。三种分膜手术效果和形成珍珠（育珠蚌为三角帆蚌）的性能对比见表1。

　　表1不同分膜手术效果和形成珍珠的性能对比

　　方法移植手术成珠速度珍珠形态珍珠质量

　　剥膜法容易慢良良，较圆

　　撕膜法方便快优优，圆

　　削膜法困难快异形颗粒大，光滑

　　1.3整形和切片把外表皮的正面（贴壳一侧的珍珠分泌面）朝上，反面（结缔组织面）朝下，平展在玻璃板上，用切片刀修整使之厚薄均匀，形状整齐，尤其是切除边缘膜有色边缘和残留在边缘膜内侧的外套膜肌。切制小片的规格一般为3mm×4mm或4mm×5mm。

　　1.4润片小片制成后，滴注保养液，保持小片湿润，维持细胞内、外渗透压平衡，增强细胞小片活力和抗菌功能，提高细胞小片移植成活率。

　　注意事项：制备小片动作要细致、轻快、熟练，切勿伤及外表皮细胞；所有工具使用前用75%酒精棉擦拭消毒；制片过程防止阳光直射，以免影响小片的活力；保持小片湿润；整个制片过程在3～5min内完成，保持细胞的生命力，避免因操作时间过长而造成小片干燥死亡。

　　2、插植小片

　　制备小片后，立即插植入育珠蚌外套膜的结缔组织中，使其愈合为一体。小片插植的步骤：开壳"固定"清洗外套膜"拔鳃"取片"创口"送片"整圆"换侧植片"拔塞"备养。

　　2.1开壳、固定育珠蚌腹缘朝上置于手术架上，用开壳器轻轻插入育珠蚌两壳之间，慢慢撑开，两端插入固口塞固定。注意开口宽度依蚌体大小而定，壳长10cm以上蚌体一般不超过1.0cm。

　　2.2洗膜、拨鳃清水荡洗外套膜及内脏团污泥后，用鸭舌板将鳃瓣和内脏团拨向暂不插片的一侧。

　　2.3插片（取片、创口、送片）插植小片有横插法和直插法两种。

　　2.3.1横插法左手持送片针轻轻点住小片正中央，右手持钩形开口针将小片卷叠在送片针的圆头上，使小片包裹成囊袋状，再用开口钩针在外套腔的中央膜上横向创口，同时左手挑起小片顺着创口送入外套膜的内、外表皮之间的结缔组织中，退出钩针在内表皮外面压住植入的小片，退出送片针。横插法具有操作方便、便于整圆、成珠率高、圆度好、插片数量多等优点。

　　2.3.2直插法在外套膜上竖向创口，将小片与育珠蚌腹缘成垂直方向插入。直插法操作简便，可移植较大的小片，但插片数量较少且容易掉片。每只蚌的植片数目，视蚌体大小而定，过大会造成育珠蚌负担过重，营养供应不足而死亡；过少则影响产量。一般6～8cm蚌体植片2～3排，10cm以上蚌体植片4排，两侧外套膜上可植片30～40片。小片插入深度0.5～0.8cm，片间距0.5～1cm，植入的小片呈梅花型排列。

　　切记送片要稳、轻、准。“一送到位”即一次将小片植入，避免多次插入，切忌穿膜，防止出现附壳珠。

　　2.4整圆当小片植入外套膜中，随即用整圆器或钩针在内表皮外面顺势往前拉，整理小片成鼓状突起。

　　2.5换侧植片一侧外套膜上的手术完成后，调换育珠蚌方向，用鸭舌板将鳃瓣和内脏团拨到已手术的一侧，进行另一侧的小片插植。

　　2.6拔塞、备养手术完成时，向壳内滴加抗菌保养液，防止伤口发炎，促进愈合。拔出塞子，将育珠蚌暂养于微流水池中，观察一段时间后，集中移至培育池中饲养。